elisa试剂盒怎么选择?
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。武汉福来生物的elisa试剂盒就不错,质量较好也不贵。在选择的时候,也需要注意其他的一些问题。1、采用何种原料和抗体,是否高效、灵敏、特异2、规范包被操作,吸附是否均匀3、重复性、可靠性6、是否提供技术服务7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本8、可检测动物类型是否丰富9、可检测指标是否齐全
完整的elisa试剂盒应包含哪些组分
完整的ELISA试剂盒应包含以下各组分:
1.已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
2.酶标记的抗原或抗体(结合物〉;
3.酶的底物;
4.阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)、参考标准品和控制血清(定量测定中),
5.结合物及标本的稀释液,
6.洗涤液;
7.酶反应终止液。【摘要】
完整的elisa试剂盒应包含哪些组分【提问】
完整的ELISA试剂盒应包含以下各组分:
1.已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
2.酶标记的抗原或抗体(结合物〉;
3.酶的底物;
4.阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)、参考标准品和控制血清(定量测定中),
5.结合物及标本的稀释液,
6.洗涤液;
7.酶反应终止液。【回答】
怎么样辨别人ELISA试剂盒的真假
1、看产品品种
首先要什么有什么的,你得好好考虑一下。
2、看生产地址
根本没有生产地址,我们知道做实验做产品需要很多的仪器、试剂、耗材,没有人相信一间简单的屋子可以生产各种样的试剂盒。
3、看产品包装
没有任何的生产地址、联系方式等信息,这种产品有问题了连个投诉的地方都没有。
4、看公司网站
有些打着国外原装旗号,整个公司网站为英文页面,实际注册IP地址在中国。如果写着国外的地址,让你国外的朋友实地去看一下!
5、做交叉验证
拿对方提供的几个种类的试剂盒,把里面的关键组份相互替换做做实验,如果交叉严重,只能说明是一种原料生产的试剂盒贴了不同的标签。
6、看价格
价格低得离谱,却打着进口大公司原料分装,核算成本,这种低得离谱的价格是连原料都买不起的。
ELISA试剂盒的真假鉴别方法?
很简单。一、设置阴性对照(PBS或ddH2O),看看其OD值是否为0二、设置阴性对照,全部(包括标准品和样品)不加一抗,看看其OD值是否为0三、设置阴性对照,全部(包括标准品和样品)不加二抗,看看其OD值是否为0 如果全面三条都没问题,盒子应该是50%合格的四、把不同的标准品在同一个包被的板子上检验,应该只有相对应的有读数,其他为0五、把标准品加在不同的板子上,应该只有相对应的有读数,其他为0 如果这两条没问题,盒子80%是合格的各种假盒子做假的手法各异,手段之高我也无法全部解答,希望能帮到你。
有谁对ELISA试剂盒了解??
(一)ELISA测定技术的发展
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 一、Elisa试剂盒测定技术的发展 临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。目前,分子生物学正在并最终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而彻底的认识,其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的,它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。 1、基因工程试剂对免疫测定技术 发展的影响 免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各总化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。 HBsAg试剂特点(检测模式:临 床抗体夹心法): 包被抗体为山羊多抗,多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。 酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位。 可测得HBsAg变异样品。 提高检测的特异性(99.98%) 提高检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml elisa试剂盒的用途 测试剂盒检测原理 ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒 的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性
[编辑本段](二) 操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 方法二 用于检测未知抗体的间接法: 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 ↓ 加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) ↓ 于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 ↓ 其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
[编辑本段](三) 试剂器材
1. 试剂 (1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml (2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml (3) 稀释液: 牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。 (4) 终止液(2M H2SO4): 蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。 (5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸馏水50ml。 (6) TMB(四甲基联苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml 底物缓冲液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl (7) ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl (8) 抗原、抗体和酶标记抗体。 (9) 正常人血清和阳性对照血清。 2. 器材: (1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。 (2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。 (3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
elisa试剂盒哪家质量好
选择elisa试剂盒的时候,需要考虑灵敏度是否高,数据是否准确,操作是否简单等方面的问题,此外,也要考虑你们实验的经费,合理选择试剂盒。在elisa试剂盒方面,武汉福来生物工程有限公司的还不错。
温育方面,武汉福来生物提醒你:
温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。
最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。一些操作者,擅自改变说明书操作,使用自己喜欢的温育时间和温育温度,这样造成一些不必要的麻烦。
不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择,随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。
怎样选择ELISA试剂盒才是正确的?
这个问题由上海恒远公司来帮您解决。一直以来,ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点,在科研中深受广大,科研工作者的喜爱.而市面上各种试剂盒,数不胜数.让大家都产生了,选择性综合症,也挑不出最适合自已的那个试剂盒.现在我们公司列出了一下,一些选购的常识,希望能为大家选购时提供帮助.ELISA试剂盒虽然有多种类型,不过它们都有一个共同特点,就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cell ELISA和酶联免疫斑点ELISPOT是两种特殊的类型,In-cell ELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检测。ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot,先在带膜的微孔板中培养细胞,然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外,我们还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA试剂盒,实际上有时候二者结合效果更好。例如,对于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。多抗能够确保捕获所有抗原,随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。上海恒远公司自成立以来,一直秉着诚信、专业的经营理念为每一位客户提供真诚的服务。我们的服务理念是:做事不离诚信二字,恒古至今,唯有诚信才能赢得最后的胜利!感谢多年以来各位老师对本公司的大力支持!希望通过我们的不懈努力能为科研事业做出更大的贡献!
elisa试剂盒的用途
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
ELISA试剂盒怎么识别真伪?
在国内生物研究蓬勃发展的现在,假冒无视科学研究的严谨性和严肃性,让广大的科研工作者被动造假,严重破坏了科研氛围,扰乱了市场秩序,联科生物整理了一些鉴别这些假冒伪劣ELISA试剂盒的方法,供广大的科研工作者和用户参考,让希望对广大科研工作者有所帮助。
购买前
【方法一】向厂家索要或从其网站下载说明书,查找ELISA的性能指标:准确度(加标回收率、稀释线性)、精密度(板内差、板间差)、灵敏度、样本值、特异性、校准。一般来说,除了校准不一定每份说明书都有外,其余的指标一般都需要罗列(部分样本需要高倍稀释的,可能没有准确度这个指标)。如果无法提供这些性能指标,则说明该试剂盒可能是假货,或者试剂盒开发过程不够科学严谨,有可能无法检测出真实的样本值。
【方法二】对于夸大ELISA涵盖的指标的范围,尤其是不常见的种属,可先去国际知名ELISA试剂盒供应商(如eBioscience、R&D)网站上搜索,如果搜索不到该种属的ELISA试剂盒,则有可能是假货,需要小心谨慎。
【方法三】将“厂家名”、“ELISA”和“假货”等关键词在网上搜索,有的网站或论坛如丁香园等会有打假曝光台。
购买后
【方法一】检查说明书、包装盒的质量,通常假冒伪劣产品为了降低成本,印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书,如上所示查找ELISA的性能指标。
【方法二】
Ⅰ.
利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:
(1)
将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody:
antigen=
1:2的混合孵育液
(2)
37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体
(3)
后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
(4)
实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
(5)
如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
Ⅱ.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假,方法如下:
(1)
取出购买的试剂盒A的包被板两条。
(2)
一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
(3)
另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
(4)
后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
(5)
实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
(6)
如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。
ELISA试剂盒是用来干嘛的,我有点感兴趣???
ELISA试剂盒该怎么来选择?
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。
但是在选择的时候,也需要注意其他的一些问题。
1、采用何种原料和抗体,是否高效、灵敏、特异
2、规范包被操作,吸附是否均匀
3、重复性、可靠性
6、是否提供技术服务
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
8、可检测动物类型是否丰富
9、可检测指标是否齐全
elisa试剂盒 就查下博欧特生物
使用方法:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。